Mise au point et validation d’une nouvelle méthode de dosage de la Vancomycine dans le plasma par HPLC
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Date
2022-07-14
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Volume Title
Publisher
Université Mouloud MAMMERI FACULTE DE MEDECINE TIZI-OUZOU
Abstract
La Vancomycine est un antibiotique glycopeptidique, son usage est réservé aux
hôpitaux pour la prise en charge des infections dus à des germes multirésistants pour lesquels il
représente le dernier rempart thérapeutique. Son efficacité pourrait toutefois s'accompagner
d'une toxicité rénale et auditive. C’est pourquoi, chez les patients à risque, son suivi
thérapeutique pharmacologique est fortement recommandé.
Afin de garantir une prise en charge optimale du patient, la fiabilité des résultats obtenus est
capitale, celle-ci est conditionnée par une validation préalable de la méthode bio-analytique qui
sera utilisée, et cela, en se basant sur des tests statistiques bien définis.
L’objectif de ce présent travail est de mettre au point, d’optimiser et de valider une
nouvelle méthode de dosage de la Vancomycine dans le plasma humain par Chromatographie
Liquide à Haute Performance, en utilisant la démarche harmonisée basée sur le profil
d'exactitude comme outil décisionnel, publié par la Société Française des Sciences et
Techniques Pharmaceutiques (SFSTP) dans la revue STP pharma pratique 2006.
Une nouvelle technique de dosage plasmatique de la Vancomycine par CLHP, en
utilisant l’étalonnage interne, a été développée aux laboratoires de Chimie Analytique et de
Biochimie du département de pharmacie de Tizi Ouzou pour une future utilisation en routine.
Les conditions opératoires optimisées de cette méthode, dont la température, le débit d’élution,
la composition de la phase mobile, son pH et les modalités de précipitation ont été décrites.
Après déprotéinisation par l’acide perchlorique, la séparation chromatographique est faite sur
une colonne C18 à 30 °C, avec une phase mobile composée d’un tampon phosphate de sodium
monobasique et du méthanol, élués selon un mode gradient. Le Céfotaxime est utilisé comme
étalon interne (EI). La détection est assurée par spectrophotométrie UV-Visible à une longueur
d’onde de 220 nm. Le temps d’analyse obtenu est de 14 minutes.
Les limites de quantification basse et haute sont respectivement 13,22 et 50 mg/L,
la régression entre les concentrations introduites et prédites est linéaire dans les limites de
quantifications avec un coefficient de détermination linéaire de 96,47 %. Les biais relatifs sont
largement inférieurs à ± 10 %, la répétabilité et la reproductibilité sont inférieures à ±5 % et
l’erreur totale ne dépasse pas les limites d’acceptabilité prédéfinies [-15%, +15%] dans
l’intervalle de dosage accepté.
La méthode de dosage élaborée s'est avérée simple, sensible, facile à mettre en oeuvre, rapide,
spécifique, fidèle, juste, exacte et linéaire dans l'intervalle [13,22-50] mg/L, avec un risque
d'avoir un maximum de 15 % des futures mesures en dehors des limites d'acceptation fixées.
En conclusion, la méthode conçue est validée et apte à être utilisée en routine pour
le dosage de la Vancomycine dans plasma chez les patients traités par cet antibiotique et
nécessitant un suivi thérapeutique pour un éventuel ajustement posologique.
Description
Keywords
Vancomycine, Vancomycine : dosage, Chromatographie Liquide à Haute Performance, Dosage plasmatique :nouvelle technique